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如何优化E1-ClipTip电动移液器连续分液功能?

 

连续分液是电动移液器最常用的功能之一,尤其适用于基于微孔板的相同体积重复分液操作。

多次分液功能背后蕴含的技术

电动移液器和连续分液器中的多次分液功能运用了反向移液技术。在反向移液中,吸入液体的体积比设定值更大。这个额外的体积作为补偿,使得连续分配的每一步分液体积均等一致。因此,我们不能认为100μL溶液分10次排出,10μL/次的分液过程中,10个10μL的分液体积都是精确的。液体很有可能在最后一步之前就耗尽了。在反向移液控制的电动移液器和连续分液器中,完成最后一步分液操作后,剩余的溶液将通过“排净”和“吹干”操作被弃掉。

E1-ClipTip连续分液功能

在E1-ClipTip电动移液器中,有两个方法可用于连续分液操作:即在预置程序preset中选择Stepper功能或者使用Matrix模块。

1、Stepper连续分液功能

连续分液功能是专为多次分液优化设计的。根据分液次数和每次的分液体积,该功能自动计算用于完成分液序列所需的体积。为了满足反向移液所需的体积,移液器将会额外吸入10%的设定体积作为补偿。

由于反向移液技术本身和毛细作用,连续分液中第一步分液明显比后面的步骤精度差,因此第一步分液需要弃掉,这能增加后面步骤的精确性。由于这些原因,在使用连续分液器时建议舍弃第一步的液体。

在Stepper连续分液模式中,会自动添加“预步骤”作为第一步,对于“预步骤”的分液建议直接弃掉或者返回原溶液中。为了减少液体浪费,预步骤的体积优化为设定体积的3%左右。例如,一把10-300μL的移液器,预步骤体积大概为9μL。

预步骤的体积自动记入吸入体积中,如果顾客想最大限度减小液体用量,可以将“预步骤关掉。

2、Matrix编程功能

Matrix编程模块用于各种不同应用的复杂移液。基本理念是,用户对每类移液操作(如吸入、排液、混合等等)进行程序关联和模块调用从而实现编程。需要注意的是,Matrix模块默认为用户在编程时,已经将把可能影响移液结果的任何移液技术和影响因素都考虑在内。这与preset预置功能不同,预置模块中的移液功能已将最优函数设置为默认值,从而确保移液的精确度。

连续分液Stepper和Matrix模式对比

由于连续分液stepper模式已经经过多步分液的最优化设置,即吸液过程中使用反向移液技术,活塞移动允许吸入一个额外的体积。

Matrix模式是为支持多种不同的移液模式而设计的,因此吸入过程中为普通的正向移液技术,活塞移动不允许吸入一个额外的体积。

当连续分液所需溶液的总体积接近移液器的最大量程时,建议使用连续分液Stepper模式,该模式已经默认为吸入一个额外的体积。例如,当用10-300μL移液器进行10x30μL的分液操作时,推荐使用stepper模式。

优化多步分液功能的精确性

如果在连续分液中经常使用一个特定的分液体积,推荐创建一个单点的校准曲线,需要注意的是该校准曲线仅限于该特定体积的校准使用,需要在Programs模块中创建并储存。

注意.单点校准曲线仅适用于一个特定体积的校准,因此仅能与相应的某一体积并用。

在E1-ClipTip的使用手册中能找到如何创建单点校准曲线、存储程序以及如何调用将该曲线进行校准的说明。

多步分液功能的指导规范

所有的Thermo Scientific移液器(包括市面上常见的空气置换式移液器)都是使用正向移液技术符合ISO8655标准情况下进行校准的。

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